Introducción:Las infecciones urogenitales por micoplasmas constituyen uno de los focos de atención en programas de control de ITS nacionales e internacionales. Los cuales han incorporado estuches comerciales para la identificación presuntiva y susceptibilidad antimicrobiana de algunas especies de micoplasmas de interés clínico. Sin embargo, otras especies relevantes desde el punto de vista médico, permanecen sin ser detectadas y muchos pacientes con sintomatología urogenital, continúan sin diagnóstico etiológico. Objetivo: Detectar Mycoplasma genitalium en muestras de hombres con uretritis. Materiales y Métodos:Se realizó un estudio longitudinal entre febrero y junio de 2014, en el que se analizaron 32 muestras de exudado uretral provenientes de pacientes con Uretritis No-Gonocócica, negativas aM. hominis y Ureaplasmaspp. mediante estuches comerciales y el método convencional de cultivo bacteriológico. Los resultados fueron comparados con técnicas moleculares.M. genitalium se detectó mediante PCR en tiempo real y los resultados positivos fueron confirmados mediante una PCR Simple ARNr 16S de M. genitalium. Además, se realizó la detección de C. trachomatis mediante PCRs para el gen momp.Resultados:Del total de muestras clínicas analizadas, el 50% (16/32) resultaron positivas a M. genitalium, y solo el 6,3 % (2/32) fueron positivas a C. trachomatis. La concentración microbiana oscilo entre 1,9 x 10⁴ a 6,8 x 10⁶ copias/mL.Conclusiones:Los resultados obtenidos demuestran una alta frecuencia de M. genitalium como agente etiológico de infecciones urogenitales en pacientes cubanos. Se corrobora la necesidad de la instauración de sitios centinelas para la vigilancia de la ocurrencia de Síndrome Uretral por M. genitalium en hombres cubanos, así como para la obtención de aislamientos autóctonos que permitan la realización de ensayos de susceptibilidad antimicrobiana para evaluar la eficacia del tratamiento sindrómico de las uretritis en Cuba.